Koagulacja białek: wysalanie vs. denaturacja
Koagulacja białek – od zolu do żelu i z powrotem
Koagulacja białek to proces, w którym cząsteczki białka, początkowo rozproszone w roztworze wodnym (zol), łączą się ze sobą, tworząc większe skupiska, zwane agregatami. W efekcie roztwór zmienia swoją konsystencję – z płynnej przechodzi w bardziej zwartą, galaretowatą, tworząc tzw. żel.
Do koagulacji białek może prowadzić wiele czynników, takich jak działanie promieniowania jonizującego, wysoka temperatura, obecność środków odwadniających (np. aceton), a także działania mechaniczne (np. wstrząsanie). Ważną rolę odgrywają tutaj sole metali lekkich, których dodanie do roztworu białka wywołuje proces wysalania, czyli odwracalnej koagulacji.
W procesie odwrotnym do koagulacji, zwanym peptyzacją, żel ulega rozpuszczeniu w wodzie, a cząsteczki białka ponownie przechodzą do stanu rozproszonego, tworząc zol.
Wysalanie białek: delikatna zmiana, odwracalny proces
Wysalanie to proces odwracalnej koagulacji białek, który polega na zmniejszeniu rozpuszczalności białka w roztworze wodnym poprzez dodanie soli, takich jak siarczan(VI) amonu (NH4)2SO4, NaCl czy Na2SO4. Jony soli, posiadając ładunki elektryczne, silniej oddziałują z cząsteczkami wody niż obojętne elektrycznie fragmenty białka. W efekcie jony soli „zabierają” wodę białku, niszcząc jego otoczkę hydratacyjną – swoisty „płaszcz” z cząsteczek wody, który stabilizuje strukturę białka w roztworze. Bez tej otoczki białka zaczynają się ze sobą łączyć, tworząc większe agregaty i wypadając z roztworu w postaci osadu.
Istotą wysalania jest to, że nie dochodzi do zerwania wiązań w strukturze białka. To tak, jakbyśmy delikatnie „zlepili” ze sobą kilka papierowych kulek – ich kształt pozostaje nienaruszony, ale tworzą większy obiekt. Dlatego po dodaniu wody do roztworu, z którego „wysolono” białko, następuje peptyzacja, czyli ponowne rozpuszczenie osadu i przywrócenie białku do stanu koloidalnego. Nasze papierowe kulki „rozklejają się” i wracają do pierwotnej formy.
Mechanizm wysalania białka
Źródło: zpe.gov.pl, GroMar Sp z o o.na podstawie http://redribbonfoundation.org/budowa-jajka-kurzego.html, licencja: CC BY-SA 3.0.
Zobacz jak możemy Ci pomóc
Denaturacja białek: drastyczne zerwanie, (nie)odwracalna zmiana
W przeciwieństwie do wysalania, denaturacja jest procesem nieodwracalnym, który polega na trwałym zniszczeniu struktury przestrzennej białka. Czynniki denaturujące, takie jak wysoka temperatura, sole metali ciężkich, stężone kwasy, alkohole, czy promieniowanie UV, działają o wiele bardziej drastycznie niż sole metali lekkich. Powodują one rozerwanie słabych wiązań (wodorowych, jonowych), a w skrajnych przypadkach nawet mostków dwusiarczkowych, które utrzymują strukturę drugorzędową i trzeciorzędową białka. W efekcie łańcuch polipeptydowy rozpada się, a białko traci swoje biologiczne właściwości. To tak, jakbyśmy naszą papierową kulkę zgniotli i podarli – nie ma już mowy o powrocie do pierwotnej formy.
Denaturacja białka jest zazwyczaj procesem nieodwracalnym, ponieważ po zniszczeniu struktury trzeciorzędowej i uwolnieniu łańcuchów bocznych, białko ma tendencję do agregacji w sposób niekontrolowany. Jeśli jednak zdenaturowane białko pozostanie rozpuszczone, może powrócić do natywnej konformacji w procesie renaturacji, w czasie powolnego usuwania czynników chemicznych i fizycznych z otoczenia i powrotu do warunków sprzed denaturacji.
Możemy więc wnioskować, że informacja o specyficznym kształcie białka jest już zapisana w jego strukturze pierwszorzędowej, która determinuje jego ostateczną konformację!
Porównanie wysalania i denaturacji białek
Cecha | Wysalanie | Denaturacja |
Mechanizm | Niszczenie otoczki hydratacyjnej | Zerwanie wiązań stabilizujących strukturę białka |
Czynniki | Sole metali lekkich (np. NaCl, (NH4)2SO4) | Temperatura, kwasy, sole metali ciężkich, alkohol, UV |
Skutek | Wytrącenie białka z roztworu bez zniszczenia struktury | Utrata aktywności biologicznej, zmiana właściwości fizykochemicznych |
Podsumowanie
Podsumowując: wysalanie i denaturacja to dwa procesy prowadzące do koagulacji białek, ale różniące się mechanizmem i skutkami. Zrozumienie tych różnic jest kluczowe w wielu dziedzinach, od biologii molekularnej, przez medycynę, po przemysł spożywczy.
Mechanizm denaturacji białka
Źródło: zpe.gov.pl, GroMar Sp. z o. o.